Titlu Proiect: DECODAREA AXEI IMUNO-INFLAMATORII ÎN CANCERUL TIROIDIAN NON-MEDULAR RAR, CA O ABORDARE INOVATOARE PENTRU NOI ABORDĂRI TERAPEUTICE COMBINATE
Număr contract: 760067/23.05.2023
Cod: 81/15.11.2022
Buget: 7.000.000 lei
Director Proiect: Prof.Dr. ROMANA NETEA MAIER, Radboud UMC Nijmegen, Olanda
Sumar: Proiectul investighează o problema majora clinica a pacienților cu cancere tiroidiene slab diferențiate (PDTC) și cancere tiroidiene anaplazice (ATC) datorita rezistentei lor la terapiile standard avand o evolutie agresiva, cu o supraviețuire limitata. O caracteristică majoră a acestor tipuri de cancer este cea inflamatorie care promovează apariția tumorii, indicând faptul că micromediul inflamator tumoral, un nou semn distinctiv al cancerului, promovează progresia tumorii și metastazarea. Scopul principal al cercetării propuse este de a evalua exhaustiv si in profunzime dezechilibrul imunitar în formele agresive de cancer tiroidian ca o abordare inovatoare pentru identificarea unor strategii terapeutice combinatorii personalizate care vizează alterarile ecosistemului imunitar ca o nouă practica de îmbunătățire a răspunsului la tratament. Pe parcursul celor 36 de luni ale acestui proiect, va fi dezvoltat un concept comprehensiv pentru intelegerea dinamicii aspectelor imunitare în PDTC și ATC folosind tehnici de mare complexitate, completate de teste funcționale in vitro și testarea in vivo a abordărilor terapeutice combinatorice. Acest lucru va fi realizat prin mai multe obiective , inclusiv caracterizarea diferitelor modificări ale sistemului imunitar în cancerele tiroidiene agresive, folosind tehnologii state-of-the-art din domeniul „omics”. Impactul pe care l-ar putea avea aceste modificări asupra modului în care aceste tumori nu răspund la terapiile convenționale va fi investigat și validat atât în modele in vitro, cât și in vivo. Modelul dezvoltat in vivo ne va permite să validăm noi strategii terapeutice combinatorii care vor putea reprezenta unulde urmat în practica clinică.
Scop general: Evaluarea dezechilibrului imunitar în formele agresive de cancer tiroidian (PDTC și ATC) ca o abordare inovatoare pentru identificarea de noi scheme terapeutice combinatorice personalizate care vizează dezechilibrele ecosistemului imunitar ca o strategie nouă de îmbunătățire a răspunsului la ICI.
Obiective specifice:
OS1. Stabilirea unui repozitoriu integrat de probe de cercetare de tumori tiroidiene agresive.
OS2. Caracterizarea modificărilor funcționale ale ecosistemului imunitar în PDTC și ATC (atât la nivel sistemic, cât și la nivel tumoral), folosind tehnici high-throughput.
OS3. Evaluarea impactului dereglării imunitare utilizând modelele de co-cultură in vitro pe PDTC și ATC.
OS4. Validarea strategiilor de tratament combinatoric a cancerelor tiroidiene agresive în modelele in vivo, ca un prim pas spre aplicații clinice viitoare.
Rezultate aşteptate:
- Elaborarea documentației necesare pentru obținerea aprobării Comisiei de Etică pentru derularea studiului de cercetare.
- Actualizarea procedurilor standard de operare pentru colectarea, anonimizarea, stocarea și procesarea probelor biologice.
- Crearea unei biobănci de probe tumorale de cancer tiroidian agresiv (ATC și PDTC), împreună cu o bază de date asociată.
- Elaborarea protocolului specific pentru analiza mutațională a probelor din biobancă (cancer tiroidian) folosind NGS.
- Obținerea profilului proteomic al probelor tumorale și integrarea acestora cu datele imunologice și markerii inflamatori.
- Selectarea liniilor celulare pentru experimentele de co-culturi.
- Elaborarea documentației privind alterările identificate în urma experimentelor de single-cell la pacienții cu PDTC.
- Identificarea imunomodulatorilor care vor fi testați în combinație cu ICI.
- Elaborarea raportului privind validarea tratamentului combinatoric.
- Implementarea unui cadru de management eficient al proiectului, incluzând monitorizarea progresului, publicarea rezultatelor în articole ISI (5 articole) și diseminarea acestora prin participări la conferințe științifice.
Rezultate obţinute:
- Documentația de etică a fost elaborată și depusă conform cerințelor în vigoare, fiind obținută aprobarea din partea Comisiei de etică.
- Set de probe biologice și bază de date asociată, incluzând matrici biologice recoltate de la 27 de pacienți (16 probe de țesut tumoral în parafină și 8 probe de gușă), precum și un set de date clinic structurat pentru 43 de pacienți diagnosticați cu diverse forme de carcinom tiroidian (anaplazic, folicular cu componente slab diferențiate, insular, mixt medular și nediferențiat, papilar – tip clasic și slab diferențiat, slab diferențiat și metastaze de carcinom nediferențiat); bază de date în curs de actualizare până la finalizarea proiectului. – Sumar baza de probe biologice
- Criterii de includere și excludere definite și aplicate pentru selecția probelor biologice.
- Set de date de expresie genică obținut prin studii microarray, rezultat din analiza comparativă a liniilor celulare anaplastice C643 și Cal-62 versus linia celulară normală HPTE, utilizat pentru identificarea modificărilor genetice și selecția compușilor pentru testele ulterioare. Panel de screening farmacologic achiziționat, conținând 263 de compuși (Selechem – L4800 Small Molecule Immuno-Oncology Compound Library), precum și set de rezultate experimentale privind evaluarea a 27 de compuși, dintre care 7 au demonstrat efecte inhibitorii semnificative asupra viabilității celulare (Halofuginone, Fludarabine phosphate, ENMD-2076, Dorsomorphin (Compound C) 2HCl, ITF3756, ENMD-2076 L-(+)-Tartaric acid, PF-477736), permițând identificarea unor candidați cu potențial terapeutic și validarea căilor celulare investigate.
- Certificat de formare profesională obținut prin participarea Dr. Raduly Lajos la cursul „Cultures cellulaires en 3D: des organoïdes vers les modèles humains complexes et standardisés, applications physiopathologiques, cancer”, organizat de Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) și desfășurat în cadrul Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon, Lyon, Franța.
- Set de date privind profilul de expresie miARN plasmatic obținut prin analiză microarray, rezultat din evaluarea comparativă a unui lot de 8 pacienți și 8 voluntari sănătoși (4 bărbați și 4 femei), evidențiind modificările asociate patologiei investigate.
- Protocol de extracție a proteinelor optimizat pentru analizele ulterioare.
- Set de probe pregătit pentru analiza transcriptomică, constând în extracția ARN-ului total din 46 de probe de țesut tumoral PDTC și ATC, cu cuantificare calitativă și cantitativă pe Nanodrop, selectându-se 16 probe pentru analiza Spatial Transcriptomics. – Lista selectie probe pentru ST
- Metodă de lucru stabilită pentru marcarea și caracterizarea celulelor tumorale anaplazice tiroidiene (ATC) și a macrofagilor, utilizând co-culturi celulare și testarea compușilor terapeutici. – Tumoroizi pe doua linii celulare – control vs tratament
- Bază de date cu compusi selectati pentru testare, însoțită de protocol de analiză a sensibilității celulare la medicamente.
- Probe biologice pregătite pentru studiul proteomic utilizând tehnologia OLINK și panelul REVEAL.
- Co-culturi realizate între celulele de carcinom tiroidian anaplazic și celulele THP1, utilizând inserturi cu porozitate de 0,4 µm, care permit comunicarea între cele două tipuri celulare exclusiv prin mediatori biologici și biochimici.
- Modele murine standardizate stabilite pentru inducerea carcinomului tiroidian anaplazic, cu distribuirea animalelor în loturi distincte (control/tratament, imunocompetente/ imunodeficiente, supuse stimulării imunologice).
Aplicaţii proiecte H2020:
- Coordonator proiect în propunerea H2020 – European Quality and Innovation in Translational Oncology, Proposal ID 101311162, Acronym EQUITY
- Partener proiect în propunerea H2020 – HORIZON-HLTH-2025-01 HORIZON-RIA, On-Chip Digital Validation of Allogeneic Cannabinoid Receptor-Based eNK Cell Therapy Targeting Personalised Lung Cancer Niche, Proposal: 101286842, Acronym traiNK-ceLL
Diseminare rezultate:
Participare la conferinţe internaţionale:
- Annual Congress of the European Association For Cancer Research, EACR-2025, 15.06.2025 – 20.06.2025, Lisabona, Portugalia, prezentare tip poster intitulat ”Screening and functional characterization of small molecule compounds with selective cytotoxicity in Anaplastic Thyroid Carcinoma” – Posterele P265; P284 https://2025.eacr.org/abstracts
- Workshop on Translational Medicine within the Strategic Research Project, 27-28 iunie 2025, Plovdiv, Bulgaria, prezentare orală intitulată ”Identifying New Drug Candidates through Gene Expression Analysis in Anaplastic Thyroid Carcinoma”
- ESMO Targeted Anticancer Therapies Congress 2026, 16-18 march 2026, Paris, Franta, Poster 117P https://cslide.ctimeetingtech.com/tat2026/attendee/confcal/session/calendar
- 155eP – Distinct microRNA expression signatures discriminate aggressive thyroid carcinoma from benign nodular goiter: A potential support in diagnosis
Participare la conferinţe naţionale:
- Human Functional Genomics Romania Conference, 3-4 septembrie 2025, Cluj-Napoca, Romania, prezentare tip poster intitulată ”ITF3756 Exhibits Inhibitory Effects In Anaplastic Thyroid Carcinoma”.
- Zilele Universității de Medicină și Farmacie „Iuliu Hațieganu” Cluj-Napoca, ediția 2025, se 8-13 decembrie 2025, https://medpharmareports.com/public/public/Supplements/2025-supplement-1.pdf
- pag. 111 – Ekaterina Isachesku, ITF3756 as a promising anticancer compound in anaplastic thyroid carcinoma
- pag. 130 – Ecaterina Isacescu, Identification and functional evaluation of novel therapeutic candidates in anaplastic thyroid carcinoma
Publicaţii:
Andreea Bojoga, Pepijn van Houten, Martin Jaeger, Katrin Rabold, Birgitte Walgreen, Liesbeth van Emst, Dumitru Ioachim, Ilse van Engen-van Grunsven, Corin Badiu, Romana T. Netea-Maier, High Local and Systemic Expression of Pentraxin-3 in Anaplastic Thyroid Cancer, Int. J. Mol. Sci. 2025, 26, 11335, https://doi.org/10.3390/ijms262311335
Echipa:
- Prof. Dr. Romana Netea-Maier, Director Proiect
- Prof. Univ. Dr. Neagoe Ioana, Cercetător cu experiență
- Braicu Cornelia, Cercetător cu experiență
- Pop Laura, Cercetător cu experiență
- Georgescu Carmen, Cercetător cu experiență
- Piciu Doina, Cercetător cu experiență
- Bica Cecilia, Cercetător Post-doctorand
- Budișan Liviuța, Cercetător Post-doctorand
- Chira Sergiu, Cercetător Post-doctorand norma partiala
- Ciocan Cristina, Cercetător Post-doctorand
- Raduly Lajos, Cercetător Post-doctorand
- Pirlog Radu, Cercetător Post-doctorand
- Gherman Madalina, Student Doctorand
- Muntean Maximilian Vlad, Cercetător Post-doctorand
- 1 poziție vacantă, Cercetător Post-doctorand
- Gheorghe-Milea Ana- Student doctorand 1
- Cebotaru Iunia Patricia-Student doctorand 2
- Isachesku Ekaterina-Student doctorand 3
- Student doctorand 4- poziție vacantă
- Sorițău Olga -Cercetător cu experiență
- Cismaru Cosmin Andrei, Cercetător Post-doctorand
- Zamfir Paula – Tehnician cercetare 1
- Chiroi Paul – Tehnician cercetare 2
- Iova Olga Maria – Tehnician cercetare 3
- Muntean Ioan Mihai- Tehnician cercetare 4
PNRR. Finanțat de Uniunea Europeană – UrmătoareaGenerațieUE
Conținutul acestui material nu reprezintă în mod obligatoriu poziția oficială a Uniunii Europene sau a Guvernului României
https://mfe.gov.ro/pnrr | https://www.facebook.com/PNRROficial
